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目的:从白血病细胞系HL-60、THP-1中分离外泌体,并对HL-60所得外泌体进行鉴定.方法:使用Total Exosome Isolation(invitrogen)试剂盒法从白血病细胞系HL-60、THP-1培养上清液中分离出外泌体,并使用透射电镜观察其形态特征,ZETASIZER Nano series-Nano-ZS仪分析外泌体粒径大小,流式细胞术进行外泌体特异性抗原分子CD63及CD81鉴定.结果:2种白血病细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物,透射电镜下观察外形呈圆形或椭圆形杯状囊泡,胞膜完整,内含低电子密度物质;粒径分析其直径为30~150nm,且此种囊泡状物表达外泌体特异性蛋白CD63、CD81.结论:从2种白血病细胞上清中分离的囊泡状物质为外泌体,Total Exosome Isolation(invitrogen)法不需要超速离心,能够简便快速地从白血病细胞系培养上清液中提取到外泌体,为外泌体在白血病中的诊断和治疗提供了新的研究方法和理论依据.

作者:刘静茹;田淼;彭小宁;谭三勤

来源:湖南师范大学学报(医学版) 2018 年 15卷 2期

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作者:
刘静茹;田淼;彭小宁;谭三勤
来源:
湖南师范大学学报(医学版) 2018 年 15卷 2期
标签:
白血病细胞 外泌体 分离 鉴定 leukemia cells exosomes isolation identification
目的:从白血病细胞系HL-60、THP-1中分离外泌体,并对HL-60所得外泌体进行鉴定.方法:使用Total Exosome Isolation(invitrogen)试剂盒法从白血病细胞系HL-60、THP-1培养上清液中分离出外泌体,并使用透射电镜观察其形态特征,ZETASIZER Nano series-Nano-ZS仪分析外泌体粒径大小,流式细胞术进行外泌体特异性抗原分子CD63及CD81鉴定.结果:2种白血病细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物,透射电镜下观察外形呈圆形或椭圆形杯状囊泡,胞膜完整,内含低电子密度物质;粒径分析其直径为30~150nm,且此种囊泡状物表达外泌体特异性蛋白CD63、CD81.结论:从2种白血病细胞上清中分离的囊泡状物质为外泌体,Total Exosome Isolation(invitrogen)法不需要超速离心,能够简便快速地从白血病细胞系培养上清液中提取到外泌体,为外泌体在白血病中的诊断和治疗提供了新的研究方法和理论依据.