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目的 构建、筛选并鉴定siRNA-ATF3表达载体,探讨转录激活因子3(ATF3)、乳腺丝氨酸蛋白酶抑制因子(Maspin)和基质金属蛋白酶2(MMP2)在转染了siRNA-ATF3表达载体的人胶质母细胞U373MG细胞株中的表达和意义.方法 构建siRNA-ATF3表达载体,并转染U373MG细胞株,以荧光定量PCR和Western blot检测筛选出有效的siRNA-ATF3表达载体,以免疫细胞化学法检测转染siRNA-ATF3表达载体的U373MG细胞株中ATF3、Maspin和MMP2的蛋白表达情况.结果 U373MG细胞中的ATF3蛋白表达量可被pSilencer siR1-ATF3和pSilencer siR2-ATF3表达载体有效降低.转染siRNA-ATF3表达载体后U373MG细胞生长状态差,增殖速度减慢.ATF3和MMP2在空白组和Control-siRNA组中的阳性表达量高于3个干扰组;与空白组和Control-siRNA组相比,Maspin在ATF3-siRNA组表达最高,在顺铂组和ATF3-siRNA+顺铂组中的表达降低.结论 siRNA-ATF3表达载体有效抑制U373MG细胞的生长和增殖,顺铂可协同增强抑制效果,ATF3、Maspin和MMP2可能协同参与了U373MG细胞的生长和增殖,siRNA-ATF3表达载体可作为治疗抑制胶质母细胞瘤生长增殖的有效手段.

作者:马斯奇;孙逸杰;朱旭强;李雪元;吴立新;闫东明

来源:中国实用神经疾病杂志 2021 年 24卷 13期

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作者:
马斯奇;孙逸杰;朱旭强;李雪元;吴立新;闫东明
来源:
中国实用神经疾病杂志 2021 年 24卷 13期
标签:
siRNA-ATF3 转录激活因子3 乳腺丝氨酸蛋白酶抑制因子 基质金属蛋白酶2 U373MG 人胶质母细胞
目的 构建、筛选并鉴定siRNA-ATF3表达载体,探讨转录激活因子3(ATF3)、乳腺丝氨酸蛋白酶抑制因子(Maspin)和基质金属蛋白酶2(MMP2)在转染了siRNA-ATF3表达载体的人胶质母细胞U373MG细胞株中的表达和意义.方法 构建siRNA-ATF3表达载体,并转染U373MG细胞株,以荧光定量PCR和Western blot检测筛选出有效的siRNA-ATF3表达载体,以免疫细胞化学法检测转染siRNA-ATF3表达载体的U373MG细胞株中ATF3、Maspin和MMP2的蛋白表达情况.结果 U373MG细胞中的ATF3蛋白表达量可被pSilencer siR1-ATF3和pSilencer siR2-ATF3表达载体有效降低.转染siRNA-ATF3表达载体后U373MG细胞生长状态差,增殖速度减慢.ATF3和MMP2在空白组和Control-siRNA组中的阳性表达量高于3个干扰组;与空白组和Control-siRNA组相比,Maspin在ATF3-siRNA组表达最高,在顺铂组和ATF3-siRNA+顺铂组中的表达降低.结论 siRNA-ATF3表达载体有效抑制U373MG细胞的生长和增殖,顺铂可协同增强抑制效果,ATF3、Maspin和MMP2可能协同参与了U373MG细胞的生长和增殖,siRNA-ATF3表达载体可作为治疗抑制胶质母细胞瘤生长增殖的有效手段.