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目的:探讨蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在大鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)及TGF-β1刺激的人近端肾小管上皮细胞-2(human kidney proximal tubular epithelial-2,HK-2)的肾纤维化模型中的作用.方法:1)15只雄性SD大鼠随机分成假手术组(sham组)、模型组(UUO组)和UUO+冈田酸(okadaicacid,OA)干预组(OA组),每组各5只.术后OA组每日给予1.8%酒精稀释的OA 30 μg/kg,胃管饲喂72h,对照组和模型组给予相等体积的1.8%酒精胃管饲喂,72 h后处死大鼠,收集血和肾组织,检测肾功能并采用免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR法检测肾组织PP2A的c亚基(PP2Ac)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、胶原-Ⅰ(collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋闩及mRNA的表达.2)采用台盼蓝排斥实验及MTT法找出适宜的OA浓度.常规培养HK-2细胞,随机分为对照组、TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/mL干预24 h)、TGF-β1+OA组(TGF-β1 5 ng/mL+OA 40 nmol/L,同时干预24 h),Western印迹检测肾小管上皮细胞PP2Ac,FN,Col-Ⅰ,E-cad 和α-SMA蛋白的表达.结果:1)肾功能表明UUO组尿素氮和肌酐较sham组升高,OA组尿素氮、肌酐均比UUO组下降(均P<0.05).

作者:奚易云;李华;李军;李瑛;刘玉平;尤燕华;段绍斌;刘虹;孙林

来源:中南大学学报(医学版) 2015 年 40卷 6期

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作者:
奚易云;李华;李军;李瑛;刘玉平;尤燕华;段绍斌;刘虹;孙林
来源:
中南大学学报(医学版) 2015 年 40卷 6期
标签:
蛋白磷酸酶2A 冈田酸 肾间质纤维化 肾小管上皮转间质分化 protein phosphatase 2A okadaic acid renal interstitial fibrosis epithelial-mesenchymal transition differentiation
目的:探讨蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)在大鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction, UUO)及TGF-β1刺激的人近端肾小管上皮细胞-2(human kidney proximal tubular epithelial-2,HK-2)的肾纤维化模型中的作用.方法:1)15只雄性SD大鼠随机分成假手术组(sham组)、模型组(UUO组)和UUO+冈田酸(okadaicacid,OA)干预组(OA组),每组各5只.术后OA组每日给予1.8%酒精稀释的OA 30 μg/kg,胃管饲喂72h,对照组和模型组给予相等体积的1.8%酒精胃管饲喂,72 h后处死大鼠,收集血和肾组织,检测肾功能并采用免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR法检测肾组织PP2A的c亚基(PP2Ac)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、胶原-Ⅰ(collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋闩及mRNA的表达.2)采用台盼蓝排斥实验及MTT法找出适宜的OA浓度.常规培养HK-2细胞,随机分为对照组、TGF-β1组(TGF-β1 5 ng/mL干预24 h)、TGF-β1+OA组(TGF-β1 5 ng/mL+OA 40 nmol/L,同时干预24 h),Western印迹检测肾小管上皮细胞PP2Ac,FN,Col-Ⅰ,E-cad 和α-SMA蛋白的表达.结果:1)肾功能表明UUO组尿素氮和肌酐较sham组升高,OA组尿素氮、肌酐均比UUO组下降(均P<0.05).