目的:探讨氨甲蝶呤(methotrexate,MTX)对调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)细胞数量及关键转录因子Foxp3mRNA的影响.方法:1)收集初诊的寻常型银屑病患者、健康对照者和经MTX治疗8周后疗效显著的寻常型银屑病患者入组,抽取外周抗凝静脉血并分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononudear cell,PBMC),采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测Treg细胞数量,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测PBMC中Foxp3 mRNA表达水平;2)将咪喹莫特(imiquimod,IMQ)连续外用在BALB/c小鼠背部,观察6d,每天拍照记录小鼠皮损变化,根据银屑病面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)进行评分,将小鼠皮损进行HE染色观察其病理改变;3)在IMQ秀导中期(第3天)使用不同剂量MTX(38.5和77.0 nmol/L)进行小鼠腹腔内注射1次,同时设置PBS组和阴性对照组,肉眼观察各组皮损外观并用HE染色方法观察皮损组织病理改变,观察6d;随后采用FCM检测小鼠脾淋巴细胞中Treg细胞数量,qRT-PCR法检测脾淋巴细胞Foxp3 mRN表达水平.结果:1)在银屑病患者外周血PBMC中Treg细胞数量及Foxp3mRNA表达水平比健康对照者明显降低(P<0.05);用MTX治疗8周后疗效显著的寻常型银屑病患者外周血Treg细胞的数量显著高
作者:匡叶红;张衡;朱武;吴丽莎;陈旺青;鲁艳;覃群师;贾学昆;廖立秋
来源:中南大学学报(医学版) 2018 年 43卷 8期