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目的:组蛋白H3K27me3去甲基化酶Jmjd3可促进棕色脂肪细胞的分化,但其对细胞内两大关键的产热细胞器(脂滴和线粒体)的超微结构的影响尚不清楚.本研究拟探索Jmjd3缺失对小鼠棕色脂肪细胞内脂滴和线粒体的影响.方法:构建Jmjd3全身敲除(Jmjd3?/?)小鼠及脂肪组织特异性条件敲除(Jmjd3F/FFabp4-Cre+)小鼠.取胚胎期19.5 d(E19.5)Jmjd3?/?及同窝对照(Jmjd3+/+)小鼠,6周龄Jmjd3F/FFabp4-Cre+及同窝对照(Jmjd3flox/+或Jmjd3+/+Fabp4-Cre+)小鼠的背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT).在光镜下观察棕色脂肪细胞形态.在电镜下观察脂滴和线粒体的超微结构.采用蛋白质印迹法检测BAT中H3K27me3,Jmjd3和解偶联蛋白1(uncouple protein 1,UCP1)蛋白质的表达.采用RT-qPCR法检测Jmjd3,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ),Fabp4,UCP1,PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,PRDM16),诱导细胞死亡DFFA样效应因子a(cell death-inducing DFFA-like effector a,CIDEa),线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM),PPARγ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1alpha,PGC-1α),线粒体细胞色素c氧化酶亚单位I(mito

作者:武晓慧;李青;魏婉丽;徐玉乔

来源:中南大学学报(医学版) 2020 年 45卷 11期

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作者:
武晓慧;李青;魏婉丽;徐玉乔
来源:
中南大学学报(医学版) 2020 年 45卷 11期
标签:
棕色脂肪细胞 Jmjd3 脂滴 线粒体 H3K27me3 解偶联蛋白1
目的:组蛋白H3K27me3去甲基化酶Jmjd3可促进棕色脂肪细胞的分化,但其对细胞内两大关键的产热细胞器(脂滴和线粒体)的超微结构的影响尚不清楚.本研究拟探索Jmjd3缺失对小鼠棕色脂肪细胞内脂滴和线粒体的影响.方法:构建Jmjd3全身敲除(Jmjd3?/?)小鼠及脂肪组织特异性条件敲除(Jmjd3F/FFabp4-Cre+)小鼠.取胚胎期19.5 d(E19.5)Jmjd3?/?及同窝对照(Jmjd3+/+)小鼠,6周龄Jmjd3F/FFabp4-Cre+及同窝对照(Jmjd3flox/+或Jmjd3+/+Fabp4-Cre+)小鼠的背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT).在光镜下观察棕色脂肪细胞形态.在电镜下观察脂滴和线粒体的超微结构.采用蛋白质印迹法检测BAT中H3K27me3,Jmjd3和解偶联蛋白1(uncouple protein 1,UCP1)蛋白质的表达.采用RT-qPCR法检测Jmjd3,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ),Fabp4,UCP1,PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,PRDM16),诱导细胞死亡DFFA样效应因子a(cell death-inducing DFFA-like effector a,CIDEa),线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM),PPARγ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1alpha,PGC-1α),线粒体细胞色素c氧化酶亚单位I(mito