目的:探讨细胞自噬与上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)之间的关系,以及自噬是否可以通过调节EMT进程影响梗阻性肾病肾纤维化进展.方法:构建大鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾纤维化模型,并将实验大鼠随机分为假手术组、UUO组、UUO+低剂量雷帕霉素组、UUO+高剂量雷帕霉素组.采用HE染色观察肾结构,Masson染色观察肾间质胶原沉积;采用蛋白质印迹法检测钙黏附蛋白E(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、锌指转录因子1(Snail 1)表达以反映细胞EMT,检测微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein-1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)表达以反映细胞自噬.构建转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理的大鼠肾小管上皮细胞NRK52E模型,并将其分为对照组、TGF-β1组、TGF-β1+Snail 1 siRNA组;为探讨自噬对EMT的影响,再将细胞分为对照组、雷帕霉素组、Beclin 1 siRNA组.采用蛋白质印迹法检测E-cadherin、α-SMA、Snail 1、LC3Ⅱ、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ)和纤维黏连蛋白(fibronectin)的表达.结果:HE染色结果显示:与假手术组比较,UUO组的肾损伤明显加重;Masson染色结果显示:与假手术组比较,UUO组的肾组织中胶
作者:张波;汝峰;陈湘;陈志
来源:中南大学学报(医学版) 2021 年 46卷 6期