目的:呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)持续感染可能是导致气道慢性疾病的病理原因,然而,其作用机制尚不清楚.囊性纤维化穿膜传导调节蛋白(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是一种顶端膜氯离子(Cl?)通道,对上皮液体、Cl?和碳酸氢盐运输的调节至关重要.CFTR功能障碍将导致支气管分泌物改变和黏液清除受损,与气道炎症有关.我们前期在RSV感染的小鼠模型中观察到气道上皮细胞CFTR表达下调.本研究通过构建RSV持续感染的气道上皮细胞模型,进一步研究其对CFTR表达和功能的影响.方法:以病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.01的RSV感染16HBE14o-细胞后继续传代.以real-time RT-PCR、免疫荧光及蛋白质印迹法检测CFTR的表达,以新型氯离子荧光探针MQAE测量细胞内Cl?浓度和全细胞膜片钳记录Cl?电流.结果:16HBE14o-细胞感染RSV病毒后存活至第3代(G3).CFTR的表达在RSV感染后从G1到G3逐渐降低,同时伴随着CFTR功能的降低.16HBE14o-细胞暴露于RSV可导致TGF-β1表达进行性升高及其下游信号分子Smad2磷酸化.用SB431542阻断TGF-β1信号通路可阻止Smad2磷酸化,增加CFTR的表达.结论:RSV感染可导致气道上皮细胞CFTR功能缺陷,其作用可能是通过激活TGF-β1信号通路介导的.|

作者：龙春姣；柒铭铭；王金美；罗金华；秦晓群；高戈；向阳

来源：中南大学学报（医学版） 2021 年 46卷 9期