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目的 从线粒体能量代谢角度研究甘草次酸对乌头碱的心肌细胞毒性拮抗作用.方法 将大鼠心肌细胞H9c2细胞随机分为10组,即空白组、甘草次酸组、4个乌头碱组(乌头碱120、240、480、960μmol/L)、4个乌头碱配伍甘草次酸组(不同浓度乌头碱分别与60μmol/L甘草次酸配伍).采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同浓度给药组对H9c2细胞的影响;采用ELISA法测定各组细胞三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)含量、ATP酶活性水平;采用活性氧探针(2,7-dichloro-di-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位探针(5,5′6,6′-tetra-chloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide,JC-1)检测细胞内线粒体膜电位、钙离子荧光探针(rhod-2 acetoxymethyl ester,Rhod-2AM)检测细胞内钙离子浓度.结果 与单用乌头碱比较,乌头碱配伍甘草次酸后心肌细胞的ATP含量、Ca2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活性升高,ROS含量减少,线粒体膜电位、线粒体内钙离子浓度降低(P<0.01或P<0.05).结论 甘草次酸可拮抗乌头碱的心肌细胞毒性,其机制可能是与保护心肌细胞线粒体、增强线粒体能量代谢、维持钙稳态有关.

作者:何苗;李耀伟;王志琪;周志华;蒲科婷;丛梦静;王嘉星

来源:湖南中医药大学学报 2021 年 41卷 11期

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作者:
何苗;李耀伟;王志琪;周志华;蒲科婷;丛梦静;王嘉星
来源:
湖南中医药大学学报 2021 年 41卷 11期
标签:
线粒体能量代谢;乌头碱;甘草次酸;心肌毒性;钙稳态
目的 从线粒体能量代谢角度研究甘草次酸对乌头碱的心肌细胞毒性拮抗作用.方法 将大鼠心肌细胞H9c2细胞随机分为10组,即空白组、甘草次酸组、4个乌头碱组(乌头碱120、240、480、960μmol/L)、4个乌头碱配伍甘草次酸组(不同浓度乌头碱分别与60μmol/L甘草次酸配伍).采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同浓度给药组对H9c2细胞的影响;采用ELISA法测定各组细胞三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)含量、ATP酶活性水平;采用活性氧探针(2,7-dichloro-di-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位探针(5,5′6,6′-tetra-chloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide,JC-1)检测细胞内线粒体膜电位、钙离子荧光探针(rhod-2 acetoxymethyl ester,Rhod-2AM)检测细胞内钙离子浓度.结果 与单用乌头碱比较,乌头碱配伍甘草次酸后心肌细胞的ATP含量、Ca2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活性升高,ROS含量减少,线粒体膜电位、线粒体内钙离子浓度降低(P<0.01或P<0.05).结论 甘草次酸可拮抗乌头碱的心肌细胞毒性,其机制可能是与保护心肌细胞线粒体、增强线粒体能量代谢、维持钙稳态有关.