目的 探讨益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响及其作用机制.方法 给予大鼠分别灌胃益肾健骨颗粒、生理盐水1周,制备含药血清及正常血清.采用背侧双切口切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松模型,分离并培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定BMSCs,将BMSCs细胞随机分为对照组(N组)、含药血清组(J组)、含药血清+si-NC组(J+C组)、含药血清+si-OPG组(J+O组),按组进行相应处理,对各组BMSCs进行诱导成骨分化,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色与茜素红S染色法检测ALP活性及矿化结节数,实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-qPCR)检测ALP、Runt相关转录因子2(Runt-associated transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA表达,Western blot检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B,RANK)、RANK配体(RANK ligand,RANKL)蛋白表达.结果 成骨分离绝经后骨质疏松大鼠BMSCs,并通过形态及CD29、CD44、CD45、CD34表达鉴定;与N组比较,J组与J+C组细胞染色加深,ALP活性、矿化结节数、ALP、Runx2、OCN mRNA表达水平及OPG蛋白表达水平显著升高(P<0.05),RANK、RANKL蛋白表达

作者：刘勇；易振宇；张信成

来源：湖南中医药大学学报 2022 年 42卷 8期