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目的 通过网络药理学预测加味独活寄生合剂治疗腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)的相关机制,并通过体外实验验证.方法 应用TCMSP、BATMAN-TCM数据库检索加味独活寄生合剂组成药物的活性成分以及潜在靶点.通过GeneCards、OMIM数据库搜集LDH相关的疾病靶点,构建"药物-化合物-疾病靶标"网络模型,获取加味独活寄生合剂干预LDH的交集靶标.运用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络获取核心靶点.使用R语言软件及Perl语言进行GO分析与KEGG通路分析获得可能的关键通路.提取原代终板软骨细胞,进行细胞形态学观察以及Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)免疫荧光染色鉴定.将体外培养的第3代终板软骨细胞随机分成5组:空白对照组、模型对照组、加味独活寄生合剂低剂量组、加味独活寄生合剂中剂量组、加味独活寄生合剂高剂量组.其中后 4组使用添加含有 10 ng/mL的白细胞介素 17(interleukin-17,IL-17)的DMEM培养基对细胞进行诱导退变造模.流式细胞技术检测各组细胞周期;ELISA检测各组细胞IL-6的含量;实时荧光定量PCR检测p-p65、MMP9 mRNA的表达;Western blot法检测p-p65、MMP9 蛋白表达情况.结果 网络药理学结果显示,根据ADME标准共筛选加味独活寄生汤 19 种药物共计 295种活

作者:蒋浩波;段嘉豪;刘恩旭;陈茜;李夏;邵乐;杨少锋;张晓

来源:湖南中医药大学学报 2023 年 43卷 11期

知识库介绍

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作者:
蒋浩波;段嘉豪;刘恩旭;陈茜;李夏;邵乐;杨少锋;张晓
来源:
湖南中医药大学学报 2023 年 43卷 11期
标签:
加味独活寄生合剂 网络药理学 腰椎间盘突出 终板软骨细胞 作用机制 炎症反应 细胞凋亡 Jiawei Duhuo Jisheng Mixture network pharmacology lumbar disc herniation endplate chondrocyte mechanism of action inflammatory response cell apoptosis
目的 通过网络药理学预测加味独活寄生合剂治疗腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)的相关机制,并通过体外实验验证.方法 应用TCMSP、BATMAN-TCM数据库检索加味独活寄生合剂组成药物的活性成分以及潜在靶点.通过GeneCards、OMIM数据库搜集LDH相关的疾病靶点,构建"药物-化合物-疾病靶标"网络模型,获取加味独活寄生合剂干预LDH的交集靶标.运用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络获取核心靶点.使用R语言软件及Perl语言进行GO分析与KEGG通路分析获得可能的关键通路.提取原代终板软骨细胞,进行细胞形态学观察以及Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)免疫荧光染色鉴定.将体外培养的第3代终板软骨细胞随机分成5组:空白对照组、模型对照组、加味独活寄生合剂低剂量组、加味独活寄生合剂中剂量组、加味独活寄生合剂高剂量组.其中后 4组使用添加含有 10 ng/mL的白细胞介素 17(interleukin-17,IL-17)的DMEM培养基对细胞进行诱导退变造模.流式细胞技术检测各组细胞周期;ELISA检测各组细胞IL-6的含量;实时荧光定量PCR检测p-p65、MMP9 mRNA的表达;Western blot法检测p-p65、MMP9 蛋白表达情况.结果 网络药理学结果显示,根据ADME标准共筛选加味独活寄生汤 19 种药物共计 295种活