目的应用反义技术原理将生长因子受体反义基因,导入人肝癌SMMC-7721细胞,阻断肝癌细胞生长因子与其受体的相互作用,研究其对肝癌细胞恶性表型的逆转作用.方法构建人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)正、反义基因重组真核表达质粒,用磷酸钙-DNA共沉淀方法转染人肝癌细胞株SMMC-7721,经G418培养基筛选得到稳定的抗性细胞.采用Northern杂交检测反义基因转染细胞内源性IGFⅡR基因mRNA转录的抑制,同时观察转染细胞克隆形成率,细胞生长曲线和软琼脂生长能力的变化.结果 IGF-ⅡR反义基因转染后,肝癌细胞的内源性IGF-ⅡR基因mRNA转录受到有效抑制;各组转染细胞克隆形成率分别为:空载体组22.0±3.6,正义组13.3±2.1,反义组4.3±2.1,反义基因转染细胞克隆形成率明显降低;软琼脂培养基细胞集落形成数为:SMMC-7721组254.8±15.9,空载体组196.4±30.4,正义组99.4±23.0,反义组0.0±0.0,说明反义基因转染细胞失去在软琼脂上生长的能力;但细胞生长曲线无明显变化.结论应用反义策略干扰肝癌细胞生长因子受体基因的异常高表达状态,可以有效阻断配体与受体间作用的生长刺激信号环路,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型.
作者：徐迪雄；陈文生；叶治家
来源：世界华人消化杂志 2001 年 9卷 2期
