目的:研究极度低氧下人胰腺癌细胞株PC-3中IAP-2袁达的变化,初步探讨其与HIF-1的相关机制.方法:PC-3细胞株分组孵育:常氧组,体积分数为20 mL/LO2/50 mL/LCO2/930 mL/LN2低氧组4 h,950 mL/LN2/50 mL/LCO2极度低氧组1、3、5 h,950 mL/LN2/50 mL/LCO2低氧3 h后复氧,另取一组加入300μmol/L氯化钴常氧孵育.用细胞免疫化学定性检测IAP-2蛋白表达;蛋白裂解液提取胞质胞核蛋白,用Western blot检测IAP-2蛋白水平变化,同时对比HIF-1蛋白表达;用RT-PCR检测IAP-2基因水平改变.结果:免疫细胞化学检测IAP-2蛋白在PC-3细胞中呈阳性表达,定位于胞质.Western blot显示常氧、低氧4 h可检测到IAP-2蛋白,表达无差异,极度低氧1 h IAP-2蛋白表达明显增加(t=3.300,P＜0.05),3、5 h IAP-2持续高表达,各时间段无显著性差异,复氧后恢复基线水平.实验还显示了HIF-1和IAP-2蛋白的表达差异:常氧组HIF-1未表达,低氧4 h可诱发,IAP-2保持基线水平;极度低氧HIF-1无变化,IAP-2表达明显增高;复氧后HIF-1不表达,IAP-2恢复基线表达;加入氯化钴后HIF-1恢复表达,IAP-2保持基线,初步表明IAP-2蛋白表达上调有独立于HIF-1的作用机制.RT-pCR检测表明,极度低氧1、3、5h后IAP-2mRNA表达明显高于常氧组(t=6.900,P＜0.05),各时间组无显著差异,复氧后恢复

作者：赵秋；谷华；杜静；覃华；刘南植

来源：世界华人消化杂志 2005 年 13卷 17期