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目的:通过构建单一质粒四环素调控载体pCEP4-tetR-IL-24,将其转染胃癌细胞系后,探讨IL-24对胃癌细胞的初步作用以及此系统能否发挥四环素的调控作用.方法:将hIL-24基因片段从pORF9-hIL-24定向克隆至pcDNA4-TO-Xpress中,再亚克隆到pCEP4-tetR中构建pCEP4-tetR-IL-24;利用脂质体转染法转染细胞;Western blotting检测蛋白表达;MTT法与台盘蓝拒染法检测细胞增殖;annexin V法检测细胞的凋亡.结果:DCEP4-tetR-IL-24转染胃癌细胞系MGC803,BGC823与正常胃黏膜细胞系GES-1后,在强力霉素诱导下均可表达IL-24蛋白;MGC803,BGC823细胞中,强力霉素诱导组的增殖较未诱导组、空载体组与对照组明显受抑制(P<0.01,0.001-0.006);强力霉素诱导组与未诱导组相比,凋亡细胞比例明显增多(23.5

作者:林宁晶;朱军

来源:世界华人消化杂志 2006 年 14卷 20期

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作者:
林宁晶;朱军
来源:
世界华人消化杂志 2006 年 14卷 20期
标签:
四环素调控 白细胞介素24 胃癌 增殖 凋亡
目的:通过构建单一质粒四环素调控载体pCEP4-tetR-IL-24,将其转染胃癌细胞系后,探讨IL-24对胃癌细胞的初步作用以及此系统能否发挥四环素的调控作用.方法:将hIL-24基因片段从pORF9-hIL-24定向克隆至pcDNA4-TO-Xpress中,再亚克隆到pCEP4-tetR中构建pCEP4-tetR-IL-24;利用脂质体转染法转染细胞;Western blotting检测蛋白表达;MTT法与台盘蓝拒染法检测细胞增殖;annexin V法检测细胞的凋亡.结果:DCEP4-tetR-IL-24转染胃癌细胞系MGC803,BGC823与正常胃黏膜细胞系GES-1后,在强力霉素诱导下均可表达IL-24蛋白;MGC803,BGC823细胞中,强力霉素诱导组的增殖较未诱导组、空载体组与对照组明显受抑制(P<0.01,0.001-0.006);强力霉素诱导组与未诱导组相比,凋亡细胞比例明显增多(23.5