目的:获得LanCL1原核和真核表达融合蛋白,制备兔抗LanCL1的多克隆抗体以用于LanCL1基因功能研究.方法:PCR扩增LanCL1 CDS编码区序列,分别亚克隆至原核和真核表达载体上.将真核表达重组质粒用脂质体转染HEK293细胞成功获得了pRK5-LanCL1真核表达融合蛋白.同时将原核表达重组质粒化学转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导GST-LanCL1原核表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,透析浓缩获得高纯度GST-LanCL1融合蛋白.将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体.结果:获得了LanCL1真核和原核表达重组融合蛋白.经亲和纯化后的GST-LanCL1融合蛋白纯度达到90
作者：余守洋；陈米娜；季一飞；夏孝强；李芳华；王德华；崔义元
来源：华西医学 2008 年 23卷 4期
