目的:构建含人细胞周期依赖激酶抑制剂p27kip1基因的重组腺病毒载体,为采用p27kip1cDNA防治肿瘤的研究奠定基础.方法:将人p27kip1cDNA插入到穿梭质粒pACCMVPLPA的CMV启动子之下,即pAd-p27kip1.后者与pJM17通过脂质体共转染293细胞,经同源重组获得含人p27kip1cDNA的重组腺病毒Ad-p27kip1.结果:p27kip1cDNA成功地插入了pACCMVPLPA载体,以重组病毒基因组DNA为模板,同时扩增出了275 bp的p27kip1基因片段和860 bp的腺病毒骨架基因片段,证实了Ad-p27kip1的正确性.病毒滴度为1.24×1012pfu/ml.结论:成功构建了携带人p27kip1基因的腺病毒Ad-p27kip1,为采用p27kip1cDNA途径防治消化道肿瘤的在体、离体实验奠定了基础.
作者：童强；吴清明；黄永章；王家宁；王卫民；于皆平
来源：武汉大学学报(医学版) 2002 年 23卷 1期
