目的:克隆人肿瘤MUC1/Y全长基因及构建真核表达载体pEGFP-MUC1/Y并观察pEGFP-MUC1/Y在 BIU-87细胞中表达以用于进一步生物学功能及肿瘤生物学治疗的研究.方法: 取新鲜膀胱肿瘤组织提取总RNA,采用随机引物进行反转录,将特异引物扩增的MUC1/Y全长PCR产物克隆至真核表达载体pEGFP-C1,测序鉴定后命名为pEGFP-MUC1/Y,用脂质体转染膀胱肿瘤细胞BIU-87,以Western Blot检测其表达情况.结果: 酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含人MUC1/Y全长cDNA编码序列, Western Blot检测和转染实验,表明构建的pEGFP-MUC1/Y基因在BIU-87真核细胞中表达,其绿色荧光蛋白瞬时表达率为20
作者:罗刚;周四维;鲁雄兵;宋晓东;孙凯;曹正国;叶章群
来源:武汉大学学报(医学版) 2005 年 26卷 2期