目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建人FRNK基因重组腺病毒, 并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒.方法:把人FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建腺病毒质粒pAdTrack-CMV-hFRNK, 经Pme Ⅰ内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒.再将获得的腺病毒重组质粒转染到HEK293细胞进行包装,获得人FRNK重组腺病毒pAdhFRNK.荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达.结果:经酶切和绿色荧光蛋白表达证明了hFRNK基因的重组腺病毒载体pAdhFRNK构建成功,并制备出高滴度的重组病毒.结论:成功构建携带人FRNK基因的重组腺病毒pAdhFRNK,为研究FRNK的基因治疗奠定了基础.
作者：曹俊；于皆平；刘超红；刘启胜；齐元玲；于红刚
来源：武汉大学学报(医学版) 2007 年 28卷 3期
