目的:探讨羧甲基壳聚糖抑制重组人白细胞介素-1β(rhlL-1β)刺激下的兔软骨细胞合成基质金属蛋白酶-1,3(MMP-1,3)的作用机制.方法:分离、培养兔软骨细胞,用rhlL-1β刺激,同时加入不同浓度的羧甲基壳聚糖(CM-chitosan)或L-精氨酸甲酯(L-NAME),培养24 h后,检测上清液中的一氧化氮含量和软骨细胞内的诱导性一氧化氮合酶(iNOS)活力.提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链方法(RT-PCR)检测iNOS,MMP-1,MMP-3的mRNA表达.通过ELISA方法枪测上清液中MMP-1,MMP一3的含量.结果:IL-1β能够增加软骨细胞一氧化氮的释放及iNOS的酶活性,诱导细胞iNOS,MMP-1,3的mRNA表达,增加MMP-1,3的分泌.羧甲基壳聚糖对软骨细胞一氧化氮的释放,iNOS酶活力及iNOS mRNA表达均有抑制作用,不同浓度的抑制效果相近;它对软骨细胞的MMP-1,3 mRNA的表达及MMP-1,3的分泌也有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性.L-NAME对软骨细胞的MMP-1,3 mRNA的表达及分泌也有抑制作用,但L-NAME与羧甲基壳聚糖对一氧化氮的影响相似时,羧甲基壳聚糖对MMP-1,3mRNA表达和分泌的抑制作用强于L-NAME.结论:羧甲基壳聚糖抑制软骨细胞合成MMP-1,MMP-3是部分通过降低iNOS表达,减少一氧化氮合成来实现的.
作者：陈庆；刘世清；李亚明；杜予民
来源：武汉大学学报（医学版） 2010 年 31卷 6期
