目的:研究蛋白激酶C-δ(PKC-δ)抑制剂Rottlerin在造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用及其机制。方法:体外培养的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分别与不同碘浓度(25，50，100，150 gI/L)的碘帕醇（非离子型造影剂）共孵育2 h；或者以100 gI/L碘帕醇先后处理NRK-52E细胞0.5，1，2，4h,相同渗透浓度(420 mOsm/kg)的甘露醇处理4h作为对照；部分细胞用2μmol/L Rottlerin与100 gI/L碘帕醇共同处理2h。Hoechst 33342染色检测凋亡细胞核形态并计算凋亡细胞百分比；并以DEVD-AFC为底物，用荧光酶标仪测量Caspase-3酶活性；用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧产物(ROS)水平；用Western blot检测PKC-δ蛋白表达和磷酸化。结果:碘帕醇与NRK-52E细胞共孵育后，细胞内PKC-δ蛋白表达和Tyr-311位点磷酸化增加，细胞内ROS产生增加，Caspase酶活性上升。碘帕醇呈浓度和时间依赖性诱导NRK-52E细胞凋亡。Rottlerin可明显抑制以上变化。结论:PKC-δ抑制剂Rottlerin通过抑制PKC-δ活化和细胞内氧化应激抑制碘帕醇诱导的NRK-52E细胞凋亡，为造影剂肾病的预防和治疗提供了新靶点和新药物。
作者：李晓宁；肖劲松；喻明霞；胡雪峰；水华；吴小燕
来源：武汉大学学报（医学版） 2011 年 32卷 6期
