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目的:探讨胃癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGFC)的表达与肿瘤新生淋巴管形成的关系.观察以pCl-neo为载体的反义血管内皮生长因子-C(Anti-VEGF-C)转染的人胃癌细胞SGC-7901中VEGF-C蛋白的表达,及其对人胃癌细胞生长的抑制作用.方法:取72例胃癌标本的癌旁组织,通过RT-pCR检测VEGF-C的mRNA表达;免疫组化检测VEGFR-3,计算出微淋巴管的密度并行相关统计分析.以脂质体转染法转染既往试验合成的重组质粒pCI-neo-antiVEGF-C到体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,用免疫组化和Westernblot分析VEGF-C基因及蛋白的表达,最后用MTT法及流式细胞仪分析其对细胞生长的抑制作用.结果:淋巴结转移阳性组中VEGF-CmRNA阳性表达85.7%,高于阴性组的20.0%(P<0.05);VEGF-CmRNA表达阳性组淋巴管密度6.36士1.66,阴性组3.95±1.52(P<0.05);淋巴结转移阳性组淋巴管密度6.65±1.57,阴性组3.75±1.47(P<0.05).重组质粒pCl-neo-antiVEGF-C转染体外培养的人胃癌细胞株后,免疫组化和Westernblot均显示pCI-neoantiVEGF-C转染组无VEGF-CmRNA及其蛋白的表达,MTT检测表明pCI-neo-antiVEGF-C转染组活细胞数较其它各组均低(P<0.05).结论:VEGF-C能促进癌旁微淋巴管增生、提高胃癌侵袭力;反义VEGF-C转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901VE

作者:余刚;朱鹏;张剑波;王继见

来源:武汉大学学报(医学版) 2012 年 33卷 3期

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作者:
余刚;朱鹏;张剑波;王继见
来源:
武汉大学学报(医学版) 2012 年 33卷 3期
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新生淋巴管形成 血管内皮生长因子-C 反义真核表达载体 人胃癌细胞株 基因转染
目的:探讨胃癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGFC)的表达与肿瘤新生淋巴管形成的关系.观察以pCl-neo为载体的反义血管内皮生长因子-C(Anti-VEGF-C)转染的人胃癌细胞SGC-7901中VEGF-C蛋白的表达,及其对人胃癌细胞生长的抑制作用.方法:取72例胃癌标本的癌旁组织,通过RT-pCR检测VEGF-C的mRNA表达;免疫组化检测VEGFR-3,计算出微淋巴管的密度并行相关统计分析.以脂质体转染法转染既往试验合成的重组质粒pCI-neo-antiVEGF-C到体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,用免疫组化和Westernblot分析VEGF-C基因及蛋白的表达,最后用MTT法及流式细胞仪分析其对细胞生长的抑制作用.结果:淋巴结转移阳性组中VEGF-CmRNA阳性表达85.7%,高于阴性组的20.0%(P<0.05);VEGF-CmRNA表达阳性组淋巴管密度6.36士1.66,阴性组3.95±1.52(P<0.05);淋巴结转移阳性组淋巴管密度6.65±1.57,阴性组3.75±1.47(P<0.05).重组质粒pCl-neo-antiVEGF-C转染体外培养的人胃癌细胞株后,免疫组化和Westernblot均显示pCI-neoantiVEGF-C转染组无VEGF-CmRNA及其蛋白的表达,MTT检测表明pCI-neo-antiVEGF-C转染组活细胞数较其它各组均低(P<0.05).结论:VEGF-C能促进癌旁微淋巴管增生、提高胃癌侵袭力;反义VEGF-C转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901VE