目的:构建解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)基因RNA干扰(RNAi)重组慢病毒载体,为进一步体内外实验研究提供基础.方法:筛选确定ADAM10基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与LentiLox 3.7载体连接,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用重组慢病毒转导传代心肌细胞(H9C2),通过Western blotting 检测心肌细胞ADAM10的蛋白表达.结果:获得的载体插入ADAM10的shRNA核苷酸链序列正确,包装的慢病毒颗粒转导心肌细胞,与对照组比较ADAM10 shRNA转染成功抑制ADAM10蛋白表达.结论:成功构建ADAM10 shRNA慢病毒载体,为其在扩张型心肌病(DCM)中的生物学功能研究奠定基础.
作者：李小鸥；黄巍；何兵；周丽荣
来源：武汉大学学报（医学版） 2013 年 34卷 1期
