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目的:探讨Akt信号通路在肾小管上皮细胞(NRK-52E)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和核因子-κB(NF-κB)表达中的作用.方法:体外培养NRK-52E细胞,分别加入不同浓度(5,15,30 g/L)白蛋白和/或Akt抑制剂Ly294002.应用RT-PCR方法测定TGF-β1 mRNA表达,Western blot测定Akt和TGF-β1蛋白的表达.应用凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活化.两两比较用t检验.结果:白蛋白呈浓度依赖性上调肾小管上皮细胞TGF-β1mRNA表达增加.TGF-β1蛋白表达也增加.白蛋白激活NF-κB活性,增加磷酸化Akt表达.Ly294002能够抑制白蛋白引起的NF-κB活性以及TGF-β1的表达.NF-κB活化与TGF-β1表达呈显著正相关(r=0.61,P<0.05).结论:白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌TGF-β1和NF-κB的活性增加,其机制部分依赖于Akt的磷酸化作用.

作者:覃慧群;水华

来源:武汉大学学报(医学版) 2013 年 34卷 5期

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作者:
覃慧群;水华
来源:
武汉大学学报(医学版) 2013 年 34卷 5期
标签:
肾小管上皮细胞 转化生长因子-β1 核因子-κB Akt信号通路 Renal Tubular Epithelial Cells Transforming Growth Factor Beta 1 Nuclear Transcription Factor-κB Akt Signal Pathway
目的:探讨Akt信号通路在肾小管上皮细胞(NRK-52E)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和核因子-κB(NF-κB)表达中的作用.方法:体外培养NRK-52E细胞,分别加入不同浓度(5,15,30 g/L)白蛋白和/或Akt抑制剂Ly294002.应用RT-PCR方法测定TGF-β1 mRNA表达,Western blot测定Akt和TGF-β1蛋白的表达.应用凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活化.两两比较用t检验.结果:白蛋白呈浓度依赖性上调肾小管上皮细胞TGF-β1mRNA表达增加.TGF-β1蛋白表达也增加.白蛋白激活NF-κB活性,增加磷酸化Akt表达.Ly294002能够抑制白蛋白引起的NF-κB活性以及TGF-β1的表达.NF-κB活化与TGF-β1表达呈显著正相关(r=0.61,P<0.05).结论:白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌TGF-β1和NF-κB的活性增加,其机制部分依赖于Akt的磷酸化作用.