目的:评价组蛋白去乙酰化酶6 (HDAC6)抑制剂Tubacin(TBA)对糖尿病性心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用和机制.方法:正常培养的H9c2细胞,采用随机数字表法分为4组(n=24):高糖常氧组(N组)、高糖缺氧复氧组(H/R组)、高糖缺氧复氧+Tubacin组(H/R+TBA组)、高糖缺氧复氧+Tubacin+ Akt抑制剂MK-2206(H/R+TBA+ MK组).高糖培养基(葡萄糖浓度33 mmol/L)培养H9c2细胞24 h.H9c2心肌细胞缺氧(95％N2+5％ CO2)4 h,复氧(90％ O2+10％ CO2)2 h制备H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤模型.TBA组H/R前6h给予Tubacin(2 μmol/L).Akt抑制剂组H/R前1h给予MK-2206 (300 nmol/L).采用ELISA法检测培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量,采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,HDAC6活性检测试剂盒检测心肌细胞HDAC6活性.Western Blot法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt,ser473)、总蛋白激酶B(t-Akt)、磷酸化叉头蛋白O3a(p-Foxo3a,ser253)和总叉头蛋白O3a(t-Foxo3a)的表达水平.结果:与N组比较,H/R组LDH释放量和细胞凋亡水平增加(P＜0.05),p-Akt、t-Akt、p-Foxo3a、t-Foxo3a蛋白表达无显著差异(P＞0.05).与H/R组比较,H/R+TBA组LDH释放量和细胞凋亡水平降低(P＜0.05),同时p-Akt和p-Foxo3a表达升高,t-Akt和t-Foxo3a无显著差异(P＞0.05).与H/R+TBA组相比,H/R+TBA+MK组L

作者：李维；孟庆涛；冷燕；熊永红；李文远；陈榕；夏中元

来源：武汉大学学报（医学版） 2018 年 39卷 6期