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目的:研究松果菊苷(ECH)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化及纤维化的影响,探讨松果菊苷改善肾纤维化的机制.方法:取对数期生长的HK-2细胞分组:正常对照组(NC,5.5 mmol/L的D-葡萄糖)、渗透浓度对照组(OSM,5.5 mmol/L的D-葡萄糖+ 24.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,30 mmol/L的D-葡萄糖)、低松果菊苷组(E-L,30 mmol/L的D-葡萄糖+125 μmol/L松果菊苷)、高松果菊苷组(E-H,30 mmol/L的D-葡萄糖+250 μmol/L松果菊苷).RT-PCR和Western Blot检测各组HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ),纤维连接蛋白(Fn),转化生长因子β1(TGF-β1),Smad3及Smad2的mRNA和蛋白质表达水平;细胞免疫组化法检测Fn和α-SMA的阳性表达.结果.:ECH对HK-2细胞增殖的影响:不同浓度的ECH(125,250 μmol/L)分别处理HK-2细胞48 h后,相较于空白对照组,差异均无统计学意义(P>0.05),提示ECH对HK-2细胞增殖活性无影响.高糖处理48 h时:①HG组HK-2细胞中α-SMA、CollagenⅢ、Fn、TGF-β1、Smad3及Smad2的mRNA和蛋白表达水平均显著高于NC组(P<0.05);②相较于NC组,OSM组细胞相关上述指标的变化均无统计学意义(P>0.05),即高浓度渗透压对HK-2细胞无显著作用;③相较HG组,ECH处理后的各浓度组HK-2细胞α-SMA、Colla

作者:李青云;张祥;唐凤娟;杨洛;郝亚荣

来源:武汉大学学报(医学版) 2020 年 41卷 2期

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作者:
李青云;张祥;唐凤娟;杨洛;郝亚荣
来源:
武汉大学学报(医学版) 2020 年 41卷 2期
标签:
肾脏纤维化 上皮间质转化 TGF-β1/Smads信号通路 松果菊苷
目的:研究松果菊苷(ECH)对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化及纤维化的影响,探讨松果菊苷改善肾纤维化的机制.方法:取对数期生长的HK-2细胞分组:正常对照组(NC,5.5 mmol/L的D-葡萄糖)、渗透浓度对照组(OSM,5.5 mmol/L的D-葡萄糖+ 24.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,30 mmol/L的D-葡萄糖)、低松果菊苷组(E-L,30 mmol/L的D-葡萄糖+125 μmol/L松果菊苷)、高松果菊苷组(E-H,30 mmol/L的D-葡萄糖+250 μmol/L松果菊苷).RT-PCR和Western Blot检测各组HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ),纤维连接蛋白(Fn),转化生长因子β1(TGF-β1),Smad3及Smad2的mRNA和蛋白质表达水平;细胞免疫组化法检测Fn和α-SMA的阳性表达.结果.:ECH对HK-2细胞增殖的影响:不同浓度的ECH(125,250 μmol/L)分别处理HK-2细胞48 h后,相较于空白对照组,差异均无统计学意义(P>0.05),提示ECH对HK-2细胞增殖活性无影响.高糖处理48 h时:①HG组HK-2细胞中α-SMA、CollagenⅢ、Fn、TGF-β1、Smad3及Smad2的mRNA和蛋白表达水平均显著高于NC组(P<0.05);②相较于NC组,OSM组细胞相关上述指标的变化均无统计学意义(P>0.05),即高浓度渗透压对HK-2细胞无显著作用;③相较HG组,ECH处理后的各浓度组HK-2细胞α-SMA、Colla