目的：探讨生物钟基因Per1对细胞周期相关基因的调控作用，以及对人口腔鳞状细胞癌细胞SCC15增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤的影响。方法构建3组针对Per1?RNA的短发夹RNA（shRNA）慢病毒重组质粒，转染SCC15细胞，用蛋白质印迹法（Western?blot）及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测筛选RNA干扰作用最强组为实验组，对照组（Control-shRNA）为对任何基因均无干扰效应的shRNA序列的质粒，空白组为未做任何处理的SCC15细胞。用qRT-PCR检测各组细胞中细胞周期相关基因Per1、p53、Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?A2、Cyclin?B1、CDK1、CDK2、CDK4、CDK6、p16、p21、Wee1、cdc25、E2F、Rb1?mRNA的表达；用流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡和细胞周期分布；将实验组和空白组细胞分别接种于裸鼠背部皮下，观察成瘤情况。结果成功构建了3组Per1-shRNA慢病毒质粒，通过qRT-PCR和Western?blot证明Per1-shRNA-Ⅰ组沉默效果最佳，作为实验组。Per1-shRNA-Ⅰ组中Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?B1、CDK1和Wee1?mRNA的表达水平高于Control-shRNA组和SCC15组（P<0.05），p53、Cyclin?A2、p16、p21和cdc25?mRNA的表达水平降低（P<0.05）；Control-shRNA组和SCC15组中各基因mRNA的表达水平无差异（P>0.05）。CDK2、CDK4、CDK6

作者：付小娟；杨凯；李晗雪；赵钦；陈丹

来源：华西口腔医学杂志 2016 年 34卷 3期