目的研究大鼠骨髓基质细胞(rMSCs)的生长特点和在诱导条件下的成骨特性。方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓基质细胞进行培养,保留贴壁细胞传代,观察、测试在培养液中添加成骨诱导剂地塞米松(Dex)10-8mol/L、β-甘油磷酸钠(β-GP)10mmol/L, 抗坏血酸(AA)50μg/ml条件下骨髓基质细胞的生长变化和成骨分化。结果形态学观察表明,rMSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞样外观。利用MTT法和流式细胞术(FCM)测定增殖的结果表明,传代次数增加,rMSCs的增殖活性升高。成骨诱导剂促进骨髓基质细胞的增殖,而且对多次传代细胞促增殖作用明显。成骨诱导剂促进骨髓基质细胞成骨,在诱导3周时即出现明显的钙化结节。组织化学染色结果显示,非诱导条件下MSCs的碱性磷酸酶(ALP)水平会随传代而升高。传3代rMSCs的ALP的表达较弱,诱导一周后ALP的表达明显升高,超过未加诱导剂的传一代大鼠成骨细胞(OB)的ALP表达。结论本实验表明所培养的rMSCs仍处于低分化水平,具有骨祖细胞的特性。
作者:韩君;陈锐;陈槐卿;田卫;邓力;唐方
来源:华西医科大学学报 2001 年 32卷 2期