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目的探讨分析凋亡与坏死淋巴瘤(Raji)细胞的定量方法.方法以1.0μmol/L地塞米松(DEX)诱导Raji细胞凋亡,用异硫氰酸荧光素标记的连接素V(AnnexinV)和碘化丙锭(PI)分别与凋亡细胞膜上的磷脂酰丝氨酸和继发性坏死细胞内降解的DNA结合,并以流式细胞术分析和分选标记细胞,用电镜和DNA凝胶电泳对分选细胞及其DNA进行鉴定.结果Annexin+细胞数随DEX孵育时间的延长而增加(r=0.97);Annexin+/PI-与Annexin+/PI+细胞经电镜和DNA梯形带确证具有凋亡与坏死细胞的特征;Annexin法可准确测定105~106细胞中的标记细胞.结论Annexin法可快速、准确地定量混合细胞内的凋亡与坏死细胞数.

作者:彭黎明;江虹;Chris Bradley

来源:华西医科大学学报 2001 年 32卷 4期

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作者:
彭黎明;江虹;Chris Bradley
来源:
华西医科大学学报 2001 年 32卷 4期
标签:
连接素V 流式细胞术 细胞凋亡 细胞坏死
目的探讨分析凋亡与坏死淋巴瘤(Raji)细胞的定量方法.方法以1.0μmol/L地塞米松(DEX)诱导Raji细胞凋亡,用异硫氰酸荧光素标记的连接素V(AnnexinV)和碘化丙锭(PI)分别与凋亡细胞膜上的磷脂酰丝氨酸和继发性坏死细胞内降解的DNA结合,并以流式细胞术分析和分选标记细胞,用电镜和DNA凝胶电泳对分选细胞及其DNA进行鉴定.结果Annexin+细胞数随DEX孵育时间的延长而增加(r=0.97);Annexin+/PI-与Annexin+/PI+细胞经电镜和DNA梯形带确证具有凋亡与坏死细胞的特征;Annexin法可准确测定105~106细胞中的标记细胞.结论Annexin法可快速、准确地定量混合细胞内的凋亡与坏死细胞数.