目的构建vasostatin重组腺病毒表达载体,并进行体外表达研究.方法根据GenBank中提供的钙网蛋白序列,设计并合成引物,以人骨骼肌cDNA文库为模板用PCR扩增出人vasostatin基因,将其克隆入T载体.经酶切及测序鉴定后亚克隆至穿梭载体,与经过限制酶处理的骨架腺病毒载体DNA-TPC复合物共转染293细胞.用Western blot检测体外表达.结果 PCR扩增出约590 bp产物,测序结果与文献报道一致.用PCR及Western blot证实重组腺病毒构建成功,能有效的表达出vasostatin蛋白.结论 vasostatin重组腺病毒载体能有效的在体外表达出vasostatin蛋白.
作者:丁振宇;杨莉;田聆;刘芬;肖飞;魏于全
来源:四川大学学报(医学版) 2004 年 35卷 4期