目的 为了探讨全长VIGILIN、VIGILIN的N端、VIGILIN的C端以及不同KH组合的功能,采取5分段扩增的策略克隆全长vigilin基因.方法 根据vigilin基因全长编码区内的限制性核酸内切酶位点,将vigilin基因全长编码区分为5段.从意外死亡健康成人肝组织中提取总RNA,RT-PCR分段扩增目的 基因,克隆至pUC118载体,测序,并亚克隆至pUC118载体,对接头部位测序.结果 获得8个大小不同的人vigilin基因编码区片段和全长编码区.重组全长vigilin质粒pC118/vigilin(12+345)经测序,与GenBank上登陆的人vigilin cDNA(NM:005336)序列完全一致.结论 用分段克隆的方法成功获得了人vigilin基因的全长编码区.
作者:杨文理;武静;谢晓砚;魏玲;覃扬
来源:四川大学学报(医学版) 2008 年 39卷 6期