目的 观察小于扰RNA(siRNA)沉默过氧化物酶体增殖物激活受体基因(PPARγ)的表达对成年大鼠缺血再灌注损伤(IRI)心肌细胞胰岛素抵抗的影响.方法 培养成年大鼠心肌细胞,构建沉默大鼠心肌细胞PPARγ基因特异siRNA,以脂质体介导转染离体培养的大鼠心肌细胞.制备心肌细胞IRI模型.采用RT PCR检测PPARγ和葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)mRNA表达,Western blot检测PPARγ蛋白表达;同位素示踪法检测细胞葡萄糖(Glu)摄取率变化.结果 IRI模型组心肌细胞PPARγ mRNA及蛋白表达较空白组不同程度增加(P均＜0.05);siRNA-PPARγ组,PPARγ mRNA及蛋白表达量较空载体组和IRI模型组明显下降(P＜0.01),空载体组PPARy mRNA及蛋白表达接近IRI模型组水平;GLUT-4 mRNA表达量空白组各时间点无明显差别,IRI模型组0 min表达量明显降低,之后随着再灌注时间增加逐渐恢复至空白组水平,空载体组GLUT-4 mRNA表达与IRI模型组无明显差别;沉默PPARγ后,细胞GLUT-4 mRNA表达较IRI模型组和空载体组减低更明显(P＜0.05),恢复较IRI模型组更慢.在胰岛素刺激下,与IRI模型组比较,siRNA-PPARγ组各时间点Glu摄取率均降低(P＜0.05),0 min下降49,78％,15 min、1h、2h分别降低38.94％、18.61％、11.54％,6h开始恢复至IRI模型组水平.空载体组与模型组比较Glu摄

作者：张建；汤全；梁贵友；刘达兴；王峰；吴芹；姚刚；张登沈

来源：四川大学学报（医学版） 2013 年 44卷 6期