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目的 通过研究三氧化二砷对人肝癌细胞株HepG2活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)水平、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的机制.方法分别采用0、2.5、5和10 μmol/L三氧化二砷处理HepG2达24 h后,MTT实验测定细胞存活率(另增25、50 μmol/L浓度组),流式细胞术检测细胞凋亡水平,DCFH-DA荧光探针测定细胞内ROS水平,5,5-二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测细胞中GSH含量,蛋白印记检测γ-GCS催化亚基GCLC和调节亚基GCLM以及核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达水平.结果 随着三氧化二砷染毒浓度的增加,HepG2细胞凋亡率、ROS水平和Nrf2蛋白表达均增加(P<0.05),而细胞存活率、GSH含量、GCLC和GCLM蛋白表达量均降低(P<0.05).结论 三氧化二砷通过诱导细胞产生ROS,抑制γ-GCS的表达以及减少GSH合成,从而诱导人肝癌细胞凋亡.

作者:赵巍;胡亚男;蒋学君;陈承志;张遵真

来源:四川大学学报(医学版) 2014 年 45卷 5期

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赵巍;胡亚男;蒋学君;陈承志;张遵真
来源:
四川大学学报(医学版) 2014 年 45卷 5期
标签:
三氧化二砷 凋亡 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 核因子E2相关因子2(Nrf2) Arsenic trioxide Apoptosis γ-GCS Nrf2
目的 通过研究三氧化二砷对人肝癌细胞株HepG2活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)水平、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的机制.方法分别采用0、2.5、5和10 μmol/L三氧化二砷处理HepG2达24 h后,MTT实验测定细胞存活率(另增25、50 μmol/L浓度组),流式细胞术检测细胞凋亡水平,DCFH-DA荧光探针测定细胞内ROS水平,5,5-二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测细胞中GSH含量,蛋白印记检测γ-GCS催化亚基GCLC和调节亚基GCLM以及核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达水平.结果 随着三氧化二砷染毒浓度的增加,HepG2细胞凋亡率、ROS水平和Nrf2蛋白表达均增加(P<0.05),而细胞存活率、GSH含量、GCLC和GCLM蛋白表达量均降低(P<0.05).结论 三氧化二砷通过诱导细胞产生ROS,抑制γ-GCS的表达以及减少GSH合成,从而诱导人肝癌细胞凋亡.