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目的 探讨神经生长因子受体作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否参与肠缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)损伤的过程及其对肠上皮细胞凋亡及occludin蛋白的影响.方法 制备SD大鼠小肠I/R损伤模型,取肠组织行免疫组化染色,观察NRAGE蛋白的表达变化;体外肠上皮永生化细胞株IEC-6给予缺氧及复氧后观察细胞NRAGE的表达变化;将NRAGE过表达慢病毒(Lv-NRAGE组)、NRAGE干扰表达慢病毒(sh-NRAGE组)及对照慢病毒(Lv-control组)感染IEC-6细胞,并设置不加慢病毒的对照组(NC组),Western blot及RT-PCR观察各组细胞NRAGE蛋白及mRNA的表达变化,流式细胞术观察各组IEC-6细胞的凋亡情况,Western blot观察感染慢病毒后紧密连接蛋白occludin蛋白的表达变化.结果 I/R损伤后肠黏膜上皮细胞NRAGE表达较sham组升高(P<0.01);体外IEC-6细胞缺氧6h后NRAGE蛋白的表达增加(P<0.01),NRAGE mRNA表达升高(P<0.01).感染慢病毒48 h后,相比于Lvcontrol组,Lv-NRAGE组早期凋亡率增加(P<0.01),occludin蛋白表达降低(P<0.01),sh-NRAGE组早期凋亡率降低(P<0.01),occludin蛋白表达增高(P<0.001).结论 NRAGE参与了I/R损伤过程,并促进肠上皮细胞凋亡,降低occludin蛋白的表达.

作者:冯奇;胡远亮;邹贵军;张朝军

来源:四川大学学报(医学版) 2017 年 48卷 4期

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作者:
冯奇;胡远亮;邹贵军;张朝军
来源:
四川大学学报(医学版) 2017 年 48卷 4期
标签:
NRAGE 缺血再灌注损伤 肠上皮细胞 细胞凋亡 NRAGE Ischemia-reperfusion injury Intestinal epithelial cells Cell apoptosis
目的 探讨神经生长因子受体作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog,NRAGE)是否参与肠缺血再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)损伤的过程及其对肠上皮细胞凋亡及occludin蛋白的影响.方法 制备SD大鼠小肠I/R损伤模型,取肠组织行免疫组化染色,观察NRAGE蛋白的表达变化;体外肠上皮永生化细胞株IEC-6给予缺氧及复氧后观察细胞NRAGE的表达变化;将NRAGE过表达慢病毒(Lv-NRAGE组)、NRAGE干扰表达慢病毒(sh-NRAGE组)及对照慢病毒(Lv-control组)感染IEC-6细胞,并设置不加慢病毒的对照组(NC组),Western blot及RT-PCR观察各组细胞NRAGE蛋白及mRNA的表达变化,流式细胞术观察各组IEC-6细胞的凋亡情况,Western blot观察感染慢病毒后紧密连接蛋白occludin蛋白的表达变化.结果 I/R损伤后肠黏膜上皮细胞NRAGE表达较sham组升高(P<0.01);体外IEC-6细胞缺氧6h后NRAGE蛋白的表达增加(P<0.01),NRAGE mRNA表达升高(P<0.01).感染慢病毒48 h后,相比于Lvcontrol组,Lv-NRAGE组早期凋亡率增加(P<0.01),occludin蛋白表达降低(P<0.01),sh-NRAGE组早期凋亡率降低(P<0.01),occludin蛋白表达增高(P<0.001).结论 NRAGE参与了I/R损伤过程,并促进肠上皮细胞凋亡,降低occludin蛋白的表达.