目的 建立micro RNA346基因多态性的毛细管电泳(CE)测定方法.方法 采用血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒提取血清样品基因组DNA,PCR扩增micro RNA346目的基因,BciT130 Ⅰ限制性内切酶酶切,产物用CE测定.对CE筛分介质质量浓度、分离电压等参数进行了优化.在优化的条件下(筛分介质质量浓度为10 g/L分离电压为12 kV),分别测定类风湿性关节炎患者和正常人血清样品micro RNA346酶切产物,并对其进行基因分型.结果 在优化的CE实验条件下(筛分介质质量浓度为10 g/L,分离电压为12 kV,25 min内可完成micro RNA346基因酶切产物检测.方法日内相对标准偏差(RSD)为0.43%~0.63%,日间RSD为1.49%~1.56%.用该法测定了96份类风湿性关节炎患者样品和43份正常人样品,结果均为micro RNA346 Ⅰ型,未发现micro RNA346Ⅱ型.结论 本研究建立的方法操作简单,具有高效、快速、样品用量少、自动化程度高等优点,适用于micro RNA类小分子RNA基因多态性的测定.
作者:任冬霞;曹一凡;孙成均;周琛;王丽梅;李永新
来源:四川大学学报(医学版) 2018 年 49卷 2期