目的 筛选出能应用于乳腺癌免疫组织化学检测的雌激素受体(ER)核酸.方法 制备ER蛋白,用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选出对ER具有高亲和力和特异性的核酸适配体.采用配体一受体相互反应实验来测定合成的ER适配体复合物的亲和力,用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗对105例乳腺癌组织进行免疫组化染色,以检测合成的ER适配体在癌组织中的特异性表达.用Kappa检验进行一致性检验.结果 线性回归法计算获得生物素化适配体与ER复合物的解离常数Kd值为(0.34±0.05) nmol/L(n=3,r=0.989),最大结合力(Bmax)为769.23 fmol/(mg prot·nmol-1·L-1).实验结果表明,分别用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗进行免疫组化染色的结果具有高度一致性.其中ER阳性和阴性样本n=105,kappa值=0.943,95％可信区间=0.879～1.006,P＜0.05;而ER弱阳性和中度/强表达样本n=75,kappa值=0.805,95％可信区间=0.642～0.967,P＜0.05.进一步观察发现,ER适配体和ER抗体能使乳腺癌组织同一部位出现阳性表达,而阴性对照组均无表达.2例子宫内膜癌用生物素化ER适配体检测,癌细胞ER表达均为阳性.结论 我们合成的ER适配体在体外能高度结合ER,ER适配体和ER抗体都能检测乳腺癌组织中ER的特异性表达.
作者：何煦；陈杰；叶尚勉；董丹丹；李科；周陶友；赵连三
来源：四川大学学报（医学版） 2019 年 50卷 3期
