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目的 研究短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默结肠癌相关转录因子2(colon cancer associated transcript 2,CCAT2)对非小细胞肺癌耐顺铂(cisplatin,DDP)细胞株(A549/DDP)的增殖、侵袭和凋亡以及体内肿瘤形成的影响.方法 shRNA-CCAT2(sh-CCA T2)或shRNA-阴性对照(shRNA-NC)转染A549/DDP细胞(并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组),通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测3组A549/DDP细胞CCAT2mRNA表达;通过MTT实验检测3组A549/DDP细胞经过不同质量浓度(0~8 mg/L)DDP处理后的增殖能力变化,并依此选定2 mg/L DDP进行后续实验.采用克隆形成实验、流式细胞法、TransweU实验检测2 mg/L DDP处理对各组细胞(并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组)增殖、凋亡、侵袭的影响,用Westemblot检测各组细胞增殖标记蛋白[Ki67蛋白、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)]、凋亡标记蛋白(Caspase-3、Caspase-9)、侵袭标记蛋白[血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-14 (matrix metalloproteinase-14,MMP-14)]蛋白的表达.裸鼠皮下注射A549/DDP细胞、转染stRNA-NC和转染sh-CCAT2的A549/DDP细胞,每3d腹腔注射DDP 2 mg/kg,连续给药7次,另

作者:贺亮;杜泽东;王阳;蒙荣钦;赵文武

来源:四川大学学报(医学版) 2020 年 51卷 3期

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作者:
贺亮;杜泽东;王阳;蒙荣钦;赵文武
来源:
四川大学学报(医学版) 2020 年 51卷 3期
标签:
CCAT2 非小细胞肺癌 顺铂
目的 研究短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默结肠癌相关转录因子2(colon cancer associated transcript 2,CCAT2)对非小细胞肺癌耐顺铂(cisplatin,DDP)细胞株(A549/DDP)的增殖、侵袭和凋亡以及体内肿瘤形成的影响.方法 shRNA-CCAT2(sh-CCA T2)或shRNA-阴性对照(shRNA-NC)转染A549/DDP细胞(并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组),通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测3组A549/DDP细胞CCAT2mRNA表达;通过MTT实验检测3组A549/DDP细胞经过不同质量浓度(0~8 mg/L)DDP处理后的增殖能力变化,并依此选定2 mg/L DDP进行后续实验.采用克隆形成实验、流式细胞法、TransweU实验检测2 mg/L DDP处理对各组细胞(并设未经处理的A549/DDP细胞为对照组)增殖、凋亡、侵袭的影响,用Westemblot检测各组细胞增殖标记蛋白[Ki67蛋白、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)]、凋亡标记蛋白(Caspase-3、Caspase-9)、侵袭标记蛋白[血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-14 (matrix metalloproteinase-14,MMP-14)]蛋白的表达.裸鼠皮下注射A549/DDP细胞、转染stRNA-NC和转染sh-CCAT2的A549/DDP细胞,每3d腹腔注射DDP 2 mg/kg,连续给药7次,另