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目的 探讨携带三磷酸腺苷结合盒转运子G2(ATP binding cassette transporter G2,ABCG2)胞外囊泡(extracellular vesicle,EVs)调控肺腺癌耐药作用及其分子机制.方法 取人肺腺癌细胞A549,建立顺铂(cis-Diaminedichloroplatinum,CDDP)耐药的肺腺癌细胞A549/CDDP;利用梯度离心法提取A549及A549/CDDP细胞释放的EVs,分别命名为EVs1及EVs2.EVs1及EVs2干预A549细胞48 h后,细胞分别命名为A549-EVs1及A549-EVs2.利用pCDNA3.1-ABCG2重组质粒转染A549细胞,建立A549/ABCG2细胞;转染空载体的A549细胞命名为A549/pCDNA3.1细胞.以MTT检测计算细胞24 h对CDDP的耐药指数;real-time PCR检测细胞、EVs中ABCG2基因表达;建立荷瘤裸鼠模型,分别接种A549及A549-EVs2细胞至裸鼠皮下,记为对照组及实验组.成瘤后腹腔注射3 mg/kg CDDP,每周1次,共2次.取皮下移植瘤组织,real-time PCR检测ABCG2基因表达,流式细胞术检测皮下移植瘤细胞凋亡率.结果 以亲代细胞A549为参照,A549/CDDP、A549/ABCG2、A549/pCDNA3.1、A549-EVs1、A549-EVs2细胞24 h对CDDP的耐药指数分别为7.17、10.06、1.02、1.19、5.40.各细胞中、EVs中ABCG2基因的表达水平相比较,A549/CDDP细胞高于A549细胞,A549/ABCG2细胞高于A549/pCDNA3.1和A549细胞,EVs2高于EVs1,A549-EVs

作者:王雷;米源;张新飞;李星;何彩一;李超;刘亮

来源:四川大学学报(医学版) 2022 年 53卷 3期

知识库介绍

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作者:
王雷;米源;张新飞;李星;何彩一;李超;刘亮
来源:
四川大学学报(医学版) 2022 年 53卷 3期
标签:
非小细胞肺癌 耐药 胞外囊泡 裸鼠 三磷酸腺苷结合转运蛋白G2
目的 探讨携带三磷酸腺苷结合盒转运子G2(ATP binding cassette transporter G2,ABCG2)胞外囊泡(extracellular vesicle,EVs)调控肺腺癌耐药作用及其分子机制.方法 取人肺腺癌细胞A549,建立顺铂(cis-Diaminedichloroplatinum,CDDP)耐药的肺腺癌细胞A549/CDDP;利用梯度离心法提取A549及A549/CDDP细胞释放的EVs,分别命名为EVs1及EVs2.EVs1及EVs2干预A549细胞48 h后,细胞分别命名为A549-EVs1及A549-EVs2.利用pCDNA3.1-ABCG2重组质粒转染A549细胞,建立A549/ABCG2细胞;转染空载体的A549细胞命名为A549/pCDNA3.1细胞.以MTT检测计算细胞24 h对CDDP的耐药指数;real-time PCR检测细胞、EVs中ABCG2基因表达;建立荷瘤裸鼠模型,分别接种A549及A549-EVs2细胞至裸鼠皮下,记为对照组及实验组.成瘤后腹腔注射3 mg/kg CDDP,每周1次,共2次.取皮下移植瘤组织,real-time PCR检测ABCG2基因表达,流式细胞术检测皮下移植瘤细胞凋亡率.结果 以亲代细胞A549为参照,A549/CDDP、A549/ABCG2、A549/pCDNA3.1、A549-EVs1、A549-EVs2细胞24 h对CDDP的耐药指数分别为7.17、10.06、1.02、1.19、5.40.各细胞中、EVs中ABCG2基因的表达水平相比较,A549/CDDP细胞高于A549细胞,A549/ABCG2细胞高于A549/pCDNA3.1和A549细胞,EVs2高于EVs1,A549-EVs