目的 建立一种基于重组甘露糖结合凝集素(MBL)蛋白-磁珠富集技术快速检测血流感染新型隐球菌的方法,为临床确诊新型隐球菌感染提供指导.方法 利用Western blot方法检测重组MBL蛋白(Ml)与新型隐球菌定性结合的情况;利用磷酸缓冲盐溶液(PBS)与兔血模拟样本检测M1-protein A磁珠对不同浓度梯度的新型隐球菌的捕获情况;比较3种不同方法[方法1,M1-proteinA磁珠富集后直接进行qPCR鉴定;方法2,M1-proteinA磁珠富集后培养加质谱鉴定;方法3(金标准),血培养加质谱鉴定]检测血液新型隐球菌的优劣.结果 M1蛋白与新型隐球菌标准株及临床株普遍结合;不同浓度梯度新型隐球菌的PBS与兔血模拟阳性样本中,Ml-protein A磁珠复合体的富集效率为18.00％～83.00％;3种新型隐球菌鉴定方法中,方法l耗时最短(4.25 h),灵敏度为10菌落形成单位/毫升(CFU/ml);方法2灵敏度可达到≤l CFU/ml,总时间57h;作为临床诊断金标准的方法3灵敏度虽也能达到≤l CFU/ml,但耗时较长,需120 h.结论 采用磁珠富集结合qPCR、MALDI-TOF MS技术,比传统血培养大大缩短了检测时间,并且具有较高的灵敏度和特异度.
作者：陈晓丽；李文革；郑皓；陈小萍；卢金星
来源：疾病监测 2020 年 35卷 10期
