目的 以液态胶原为支架,小鼠胚胎干细胞(ESCs)为细胞模型,构建ESCs-胶原复合体,旨在尝试建立一种能够实现干细胞生长、分化的三维培养体系.方法 提取鼠尾胶原,观察ESCs在自制胶原条带内增殖的形态特征,并测定葡萄糖/乳酸活性.以ESCs源心肌细胞为目的细胞,利用免疫组化、RT-PCR及电镜技术评价胶原条带内ESCs进行自发性分化的能力.结果 ESCs在胶原条带所提供的三维培养体系内生长、增殖状态良好,且彼此间能够建立细胞连接.胶原条带内部分ESCs能够自发性分化为心肌细胞.该心肌细胞均可表达心肌蛋白cTn-T,心肌转录因子NKX2.5及肌球蛋白轻链MLC-2v mRNA,且肌小节结构发育成熟.结论 以液态I型胶原为主体的支架材料可以为ESCs提供良好的生长基质,促进其组织化发育.该实验初步明确了体外构建干细胞生长分化三维模型的可行性.
作者:魏国峰;李向东;张维疆;曲鹏
来源:基础医学与临床 2008 年 28卷 3期