目的 检测PGC-1α和ERRα在人肝癌细胞(HepG2)中对小鼠SHP转录的影响,鉴定ERRα调节SHP启动子利用的顺式元件.方法 在HepG2细胞和人胚肾细胞(293A)中瞬时转染ERRα和/或PGG-1α,双荧光酶报告基因实验检测小鼠SHP启动子的活性.构建5'删切和顺式元件突变的启动子报告基因,结合HepG2细胞中的双荧光酶报告基因实验,检测ERRα作用的结合位点.结果 在HepG2和293A细胞中,共表达ERRα和PGC-1α能促进SHP转录.分析SHP启动子序列发现5个潜在的ERRα结合位点.通过删切启动子5'端,筛选出其中3个元件参与SHP的转录调节.进一步突变以上3个结合元件,鉴定到其中2个位点参与PGC-1α协同ERRα调节SHP转录的过程,另一个位点参与了SHP基本水平的转录.结论 在HepG2细胞中,除核受体FXR、ERRγ之外,发现ERRα可以作为调节SHP基因转录的新途径,但需共激活因子PGC-1α同时存在.
作者:朱缪娈;崔颖;方福德;常永生
来源:基础医学与临床 2010 年 30卷 6期