目的 研究慢病毒载体介导超极化激活的环核苷酸门控通道基因4(HCN4)转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)重建起搏离子通道的可行性. 方法 全骨髓法分离大鼠股骨及胫骨的MSCs,流式细胞术鉴定rMSCs;应用四质粒表达系统构建包含目的 基因HCN4的慢病毒载体lentiV-HCN4-GFP,对照组慢病毒载体为仅含有报告基因GFP的慢病毒载体lentiV-GFP;慢病毒载体转染rMSCs;RT-PCR及荧光显微镜检测HCN4在rMSCs中的mRNA及蛋白表达;电压钳检测阳性转染细胞的起搏电流的特点. 结果 HCN4基因转染MSCs的阳性率约60
作者:童敏;杨向军;韩莲花;李红霞;赵欣;周亚峰;蒋文平
来源:基础医学与临床 2010 年 30卷 7期