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目的 构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS.方法 针对HCV基因组的保守区(5'UTR)设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基(M1 RNA)的3'末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶.结果 体外切割实验表明,所构建的核酶(MIGS-HCV/C67)对HCV 5'UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割.结论 构建了一种对HCV 5'UTR具有靶向切割活性的MIGS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础.

作者:张文军;刘碧瑜;周玉珍;林桂先;张欣;李红枝

来源:基础医学与临床 2011 年 31卷 1期

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作者:
张文军;刘碧瑜;周玉珍;林桂先;张欣;李红枝
来源:
基础医学与临床 2011 年 31卷 1期
标签:
丙型肝炎病毒 5'非编码区 核糖核酸酶P 靶向切割
目的 构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS.方法 针对HCV基因组的保守区(5'UTR)设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基(M1 RNA)的3'末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶.结果 体外切割实验表明,所构建的核酶(MIGS-HCV/C67)对HCV 5'UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割.结论 构建了一种对HCV 5'UTR具有靶向切割活性的MIGS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础.