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目的 研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制.方法 取2~3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间.用Western blot和实时荧光定量RT-PCR法检测热休克蛋白90(HSP90)、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达,小凹蛋白(Caveolin-1)、eNOS、P-eNOS蛋白及mRNA的表达,二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)mRNA表达.结果 与静息和激活状态下的对照组相比,在Hcy作用下,Caveolin-1蛋白的表达上调(P<0.05),而Akt蛋白的表达下调(P<0.05),且均呈浓度、时间依赖性.eNOS蛋白的表达无明显改变.Hcy对其他检测指标无影响.结论 Hcy引起的eNOS活性降低与增强Caveolin-1蛋白表达使其与eNOS藕联增加,减少HSP90、Akt和eNOS复合物的形成,进而抑制了eNOS的活性有关.

作者:钟华;胡清华;张会敏;赵丹;孙志萍;李增春;何芳

来源:基础医学与临床 2011 年 31卷 8期

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作者:
钟华;胡清华;张会敏;赵丹;孙志萍;李增春;何芳
来源:
基础医学与临床 2011 年 31卷 8期
标签:
同型半胱氨酸 eNOS 人脐静脉内皮细胞 A23187
目的 研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制.方法 取2~3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间.用Western blot和实时荧光定量RT-PCR法检测热休克蛋白90(HSP90)、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达,小凹蛋白(Caveolin-1)、eNOS、P-eNOS蛋白及mRNA的表达,二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)mRNA表达.结果 与静息和激活状态下的对照组相比,在Hcy作用下,Caveolin-1蛋白的表达上调(P<0.05),而Akt蛋白的表达下调(P<0.05),且均呈浓度、时间依赖性.eNOS蛋白的表达无明显改变.Hcy对其他检测指标无影响.结论 Hcy引起的eNOS活性降低与增强Caveolin-1蛋白表达使其与eNOS藕联增加,减少HSP90、Akt和eNOS复合物的形成,进而抑制了eNOS的活性有关.