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目的 建立稳定表达AFP-siRNA质粒的肝癌细胞系并探讨对其增殖的影响.方法 构建AFP-siRNA,用脂质体法转染肝癌细胞系,G418筛选4~5周,Western blot及RT-PCR检测靶基因表达,分组:实验组、转染AFP-siRNA组;阳性对照组、转染空载体组;空白对照组、未处理组.MTT绘制生长曲线,平板克隆实验观察集落形成,流式细胞仪分析细胞周期.结果 成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,实验组表达AFP近乎完全抑制;实验组增殖能力显著低于空载体组;实验组>75μm集落形成数19±2,低于空载体组62±6;实验组G1期细胞数较空载体组提高20

作者:贺涛;崔宏;王云检;黄长山;黄涛;韩风;张玲

来源:基础医学与临床 2011 年 31卷 8期

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作者:
贺涛;崔宏;王云检;黄长山;黄涛;韩风;张玲
来源:
基础医学与临床 2011 年 31卷 8期
标签:
甲胎蛋白 原发性肝癌 细胞增殖
目的 建立稳定表达AFP-siRNA质粒的肝癌细胞系并探讨对其增殖的影响.方法 构建AFP-siRNA,用脂质体法转染肝癌细胞系,G418筛选4~5周,Western blot及RT-PCR检测靶基因表达,分组:实验组、转染AFP-siRNA组;阳性对照组、转染空载体组;空白对照组、未处理组.MTT绘制生长曲线,平板克隆实验观察集落形成,流式细胞仪分析细胞周期.结果 成功建立稳定表达AFP-siRNA的肝癌细胞系,实验组表达AFP近乎完全抑制;实验组增殖能力显著低于空载体组;实验组>75μm集落形成数19±2,低于空载体组62±6;实验组G1期细胞数较空载体组提高20