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目的 构建人生长激素启动子(hGHp)调控的基因治疗载体pSNAV2.0-hGHp-TNFα并探索其对体外垂体生长激素腺瘤的抑制作用.方法 以pSNAV2.0-hGHp-EGFP和pSNAV2.0-TNFα为基础通过酶切、连接反应构建pSNAV2.0-hGHp-TNFα,用脂质体转染法验证hGHp的靶向转录活性,用ELISA检测治疗基因TNFα的表达并用MTT法检测体外TNFα基因表达对垂体生长激素腺瘤的抑制作用.结果 所得质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα的测序结果正确;pSNAV2.0-hGHp-EGFP只在GH3细胞检测到绿色荧光而在对照细胞中未检测到绿色荧光;转染了pSNAV2.0-hGHp-TNFα的实验组中GH3细胞的生长较对照组明显受抑制(P<0.05).结论 首次成功构建了质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα,且其可以明显抑制体外垂体生长激素腺瘤的生长.

作者:田锋;钱海利;林晨;王任直

来源:基础医学与临床 2013 年 33卷 5期

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作者:
田锋;钱海利;林晨;王任直
来源:
基础医学与临床 2013 年 33卷 5期
标签:
肿瘤坏死因子 人生长激素启动子 垂体腺瘤 基因治疗
目的 构建人生长激素启动子(hGHp)调控的基因治疗载体pSNAV2.0-hGHp-TNFα并探索其对体外垂体生长激素腺瘤的抑制作用.方法 以pSNAV2.0-hGHp-EGFP和pSNAV2.0-TNFα为基础通过酶切、连接反应构建pSNAV2.0-hGHp-TNFα,用脂质体转染法验证hGHp的靶向转录活性,用ELISA检测治疗基因TNFα的表达并用MTT法检测体外TNFα基因表达对垂体生长激素腺瘤的抑制作用.结果 所得质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα的测序结果正确;pSNAV2.0-hGHp-EGFP只在GH3细胞检测到绿色荧光而在对照细胞中未检测到绿色荧光;转染了pSNAV2.0-hGHp-TNFα的实验组中GH3细胞的生长较对照组明显受抑制(P<0.05).结论 首次成功构建了质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα,且其可以明显抑制体外垂体生长激素腺瘤的生长.