目的 以优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠(SHR)血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9 (MMP-9)的活性.方法 以含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法为基础,改变孵育时间、工作液成份,采用不同pH值的孵育液及不同冻融次数的样品,观察对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响.并以优化的酶谱法检测Wistar及自发性高血压大鼠血浆MMPs的相对活性.结果 凝胶孵育时间由42 h缩短为17 h不影响酶谱法检测结果.省略漂洗步骤及洗脱液仅使用2.5％ Triton X-100、孵育液中去除NaN3及NaCl且电泳后步骤将去离子水更换为蒸馏水也不影响实验结果.孵育液pH值在7.2～8.8范围内均可用于酶谱法.血浆样品反复冻融多达6次不影响酶谱法检测结果.用优化的酶谱法检测结果显示,与Wistar大鼠相比,SHR大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性显著增高.结论 优化酶谱法与常规方法相比更为简便经济,检测大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性所得结果一致.
作者：李炳蔚；苑晓晨；王冰；秦伟伟；李宏伟；刘淑英；修瑞娟
来源：基础医学与临床 2013 年 33卷 7期
