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目的 探讨抑制自噬后对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧诱导的促凋亡蛋白Bim、caspase-3表达的影响及低氧诱导因子1(HIF-1)的调控作用.方法 体外培养1~3d龄SD大鼠心肌细胞建立缺氧模型,检测缺氧0、2、4、8、14和24 h时自噬情况,取自噬显著升高的时间点细胞作为单纯缺氧组(anoxia组),缺氧前用10 mmol/L3-甲基腺嘌呤(3MA)预处理心肌细胞1h作为缺氧+3-甲基腺嘌呤组(anoxia+ 3MA组),设立正常对照组(control组).倒置显微镜下观察各组心肌细胞的搏动频率和异常节律;全自动血液生化分析仪检测乳酸脱氢酶LDH的活性;Western blot检测各组中LC3-Ⅱ/Ⅰ、Bim、caspase-3和HIF-1蛋白表达情况.结果 抑制自噬后心肌细胞搏动频率明显减弱并可见异常节律、LDH释放增加(P<0.05),同时Bim和caspase-3表达明显升高(P<0.05);缺氧+3MA组中HIF-1蛋白表达明显低于单纯缺氧组(P<0.05).结论 自噬抑制剂抑制自噬后导致缺氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞凋亡增加,HIF-1正调控缺氧诱导的自噬抵抗凋亡发挥心肌保护作用.

作者:王路乔;黄波;黄茶花;王伶;程晓曙

来源:基础医学与临床 2014 年 34卷 2期

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作者:
王路乔;黄波;黄茶花;王伶;程晓曙
来源:
基础医学与临床 2014 年 34卷 2期
标签:
自噬 缺氧 Bim caspase-3 HIF-1 autophagy anoxia Bim caspase-3 HIF-1
目的 探讨抑制自噬后对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧诱导的促凋亡蛋白Bim、caspase-3表达的影响及低氧诱导因子1(HIF-1)的调控作用.方法 体外培养1~3d龄SD大鼠心肌细胞建立缺氧模型,检测缺氧0、2、4、8、14和24 h时自噬情况,取自噬显著升高的时间点细胞作为单纯缺氧组(anoxia组),缺氧前用10 mmol/L3-甲基腺嘌呤(3MA)预处理心肌细胞1h作为缺氧+3-甲基腺嘌呤组(anoxia+ 3MA组),设立正常对照组(control组).倒置显微镜下观察各组心肌细胞的搏动频率和异常节律;全自动血液生化分析仪检测乳酸脱氢酶LDH的活性;Western blot检测各组中LC3-Ⅱ/Ⅰ、Bim、caspase-3和HIF-1蛋白表达情况.结果 抑制自噬后心肌细胞搏动频率明显减弱并可见异常节律、LDH释放增加(P<0.05),同时Bim和caspase-3表达明显升高(P<0.05);缺氧+3MA组中HIF-1蛋白表达明显低于单纯缺氧组(P<0.05).结论 自噬抑制剂抑制自噬后导致缺氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞凋亡增加,HIF-1正调控缺氧诱导的自噬抵抗凋亡发挥心肌保护作用.