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目的:探讨miR-141对口腔鳞状细胞癌( OSCC) CAL27细胞增殖活性的影响及其与EphA2的靶向关系。方法构建pre-miR-141、EphA2野生型(EphA2-WT)和突变型(EphA2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-141的转染效率。用MTT检测细胞增殖活性,用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和Western blot验证miR-141与EphA2的靶向关系。结果 pcDNATM6.2-GW-pre-miR-141、pmirGLO-EphA2-WT和pmirGLO-E-phA2-MT表达载体构建成功,转染pre-miR-141的CAL27细胞miR-141的表达显著升高( P<0.001)。 miR-141过表达能够明显抑制CAL27细胞的增殖( P<0.05),共转染pre-miR-141和EphA2-WT的CAL 27细胞其荧光活性显著下降(P<0.001),转染pre-miR-141的CAL27细胞其EphA2的表达要显著低于转染空质粒组(P<0.001),miR-141的过表达能够显著抑制EphA2的蛋白表达水平。结论 miR-141的过表达可能通过靶向下调EphA2的表达从而抑制OSCC的增殖。

作者:韩哲;李磊;周晓清

来源:基础医学与临床 2015 年 2期

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作者:
韩哲;李磊;周晓清
来源:
基础医学与临床 2015 年 2期
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口腔鳞状细胞癌 miR-141 EphA2 增殖 oral squamous cell carcinoma miR-141 EphA2 proliferation
目的:探讨miR-141对口腔鳞状细胞癌( OSCC) CAL27细胞增殖活性的影响及其与EphA2的靶向关系。方法构建pre-miR-141、EphA2野生型(EphA2-WT)和突变型(EphA2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测pre-miR-141的转染效率。用MTT检测细胞增殖活性,用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和Western blot验证miR-141与EphA2的靶向关系。结果 pcDNATM6.2-GW-pre-miR-141、pmirGLO-EphA2-WT和pmirGLO-E-phA2-MT表达载体构建成功,转染pre-miR-141的CAL27细胞miR-141的表达显著升高( P<0.001)。 miR-141过表达能够明显抑制CAL27细胞的增殖( P<0.05),共转染pre-miR-141和EphA2-WT的CAL 27细胞其荧光活性显著下降(P<0.001),转染pre-miR-141的CAL27细胞其EphA2的表达要显著低于转染空质粒组(P<0.001),miR-141的过表达能够显著抑制EphA2的蛋白表达水平。结论 miR-141的过表达可能通过靶向下调EphA2的表达从而抑制OSCC的增殖。