目的 研究整合素连接激酶(ILK)特异siRNA沉默ILK基因对膀胱癌EJ细胞上皮间质转化(EMT)及移植瘤生长的影响.方法 用特异性ILK siRNA表达载体pGensil-1 siRNA1质粒和对照质粒pGensil-l siRNA3稳定转染EJ细胞,实验分为EJ siRNA组、EJ vector组和EJ细胞组;激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架;Western blot检测p-AKT、p-GSK-3β蛋白的表达;细胞免疫荧光检测p-AKT 、p-GSK-3β的表达;用免疫荧光检测整合素连接激酶和核糖核酸酶抑制因子在EJ细胞中的共定位;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;建立裸鼠移植瘤模型,肿瘤和肺组织切片HE染色,免疫组化检测瘤组织中1LK、RI、NM23-H1和E-cadherin蛋白的表达;免疫荧光检测p-AKT 、p-GSK-3β和CD31蛋白的表达.结果 EJ siRNA组细胞运动能力减弱;EJ siRNA组p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达明显降低(P ＜0.05);MTT法结果提示实验组细胞增殖明显受到抑制;下调ILK通过阻滞G0/G1期抑制细胞增殖;下i调ILK抑制膀胱癌EJ细胞移植瘤生长转移.结论 特异性ILK siRNA可以改变EJ细胞特性,抑制EMT的发生,引起增殖侵袭能力下降.
作者：吕梦欣；庄翔；朱军；陈俊霞
来源：基础医学与临床 2016 年 36卷 2期
