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目的 探究胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖和神经分化的影响.方法 通过全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,免疫荧光检测IGFBP4在P1、P4、P6、P8和P10 BMSCs的表达.取第4代BMSC细胞,分为单纯培养基组和添加IGFBP4组,用CCK8试剂盒检测单纯培养基组和添加IGFBP 4组吸光度值A450nm.再将BMSC细胞分为3组:neurocuh组、EGF+ bFGF组、EGF+ bFGF+ IGFBP4组,每组连续测定7d,每天6个平行孔,诱导培养基NeuroCult培养再分别添加EGF+ bFGF和EGF+ bFGF+ IGFBP4,诱导其向神经祖细胞分化,免疫荧光染色检测Nestin和Sox-2表达,并观察神经球数量和细胞增殖活性.结果 成功获得原代大鼠BMSCs,可见CD105、CD44和CD90表达,IGFBP4的表达随培养代数而增加,外源IGFBP4能明显抑制BMSCs的增殖(P<0.05).经诱导BMSCs形成的神经球样结构表达Nestin和Sox-2,细胞增殖活性升高(P<0.05).结论 IGFBP4能抑制BMSCs的增殖,促进其向神经祖细胞分化.

作者:李慧文;于树夔;郝飞;牛含虚;徐群渊;段德义

来源:基础医学与临床 2016 年 36卷 4期

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作者:
李慧文;于树夔;郝飞;牛含虚;徐群渊;段德义
来源:
基础医学与临床 2016 年 36卷 4期
标签:
胰岛素样生长因子结合蛋白-4 骨髓间充质干细胞 神经分化 insulin-like growth factor binding protein-4(IGFBP4) bone marrow mesenchymal stem cell(BMSC) neural differentiation
目的 探究胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖和神经分化的影响.方法 通过全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,免疫荧光检测IGFBP4在P1、P4、P6、P8和P10 BMSCs的表达.取第4代BMSC细胞,分为单纯培养基组和添加IGFBP4组,用CCK8试剂盒检测单纯培养基组和添加IGFBP 4组吸光度值A450nm.再将BMSC细胞分为3组:neurocuh组、EGF+ bFGF组、EGF+ bFGF+ IGFBP4组,每组连续测定7d,每天6个平行孔,诱导培养基NeuroCult培养再分别添加EGF+ bFGF和EGF+ bFGF+ IGFBP4,诱导其向神经祖细胞分化,免疫荧光染色检测Nestin和Sox-2表达,并观察神经球数量和细胞增殖活性.结果 成功获得原代大鼠BMSCs,可见CD105、CD44和CD90表达,IGFBP4的表达随培养代数而增加,外源IGFBP4能明显抑制BMSCs的增殖(P<0.05).经诱导BMSCs形成的神经球样结构表达Nestin和Sox-2,细胞增殖活性升高(P<0.05).结论 IGFBP4能抑制BMSCs的增殖,促进其向神经祖细胞分化.