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目的 探讨乙肝病毒(HBV)对肝癌细胞转移能力的影响及其可能机制.方法 以初始汇合度为30%,将3种细胞系HL-7702(人正常肝细胞系)、HepG2(未转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)、HepG2.2.15(稳定转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)种植于96孔板中,待细胞增殖至70%汇合时,利用划痕器制造划痕伤口,置于活细胞动态成像系统中进行多时间点的显微拍照与数据采集,计算相对伤口密度(RWD),并通过免疫荧光染色与Western blot技术测定细胞中EphA2蛋白表达,分析其与RWD值的相关性.结果 细胞迁移实验中,划痕后24~96 h,HL-7702组RWD显著高于HepG2与HepG2.2.15组(P<0.01),划痕后72 ~ 144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.01);细胞侵袭实验中,HL-7702细胞因不能穿过基质胶,而无RWD值;划痕后72~144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.05或P<0.01).EphA2表达:与HL-7702组比较,HepG2与HepG2.2.15组细胞中EphA2表达水平显著升高(P<0.01),其中HepG2.2.15组中EphA2表达水平显著高于HepG2组(P<0.01),且两组肝癌细胞中EphA2的表达量与划痕实验的RWD值呈显著正相关(迁移实验:P<0.01;侵袭实验:P<0.01).结论 乙肝病毒可能促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调EphA2的异常表达有关.

作者:刘辉;王凤梅;骆莹;王鹏;翟道宽;石文霞;李成龙;朱争艳

来源:基础医学与临床 2016 年 36卷 10期

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作者:
刘辉;王凤梅;骆莹;王鹏;翟道宽;石文霞;李成龙;朱争艳
来源:
基础医学与临床 2016 年 36卷 10期
标签:
肝癌 乙肝病毒 迁移 侵袭 EphA2 hepatocellular carcinoma hepatitis B virus (HBV) migration invasion EphA2
目的 探讨乙肝病毒(HBV)对肝癌细胞转移能力的影响及其可能机制.方法 以初始汇合度为30%,将3种细胞系HL-7702(人正常肝细胞系)、HepG2(未转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)、HepG2.2.15(稳定转染HBV-DNA的人肝癌细胞系)种植于96孔板中,待细胞增殖至70%汇合时,利用划痕器制造划痕伤口,置于活细胞动态成像系统中进行多时间点的显微拍照与数据采集,计算相对伤口密度(RWD),并通过免疫荧光染色与Western blot技术测定细胞中EphA2蛋白表达,分析其与RWD值的相关性.结果 细胞迁移实验中,划痕后24~96 h,HL-7702组RWD显著高于HepG2与HepG2.2.15组(P<0.01),划痕后72 ~ 144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.01);细胞侵袭实验中,HL-7702细胞因不能穿过基质胶,而无RWD值;划痕后72~144 h,HepG2.2.15组RWD显著高于HepG2组(P<0.05或P<0.01).EphA2表达:与HL-7702组比较,HepG2与HepG2.2.15组细胞中EphA2表达水平显著升高(P<0.01),其中HepG2.2.15组中EphA2表达水平显著高于HepG2组(P<0.01),且两组肝癌细胞中EphA2的表达量与划痕实验的RWD值呈显著正相关(迁移实验:P<0.01;侵袭实验:P<0.01).结论 乙肝病毒可能促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与上调EphA2的异常表达有关.